UV1901紫外可見分光光度計的校正意思就是將儀器的響應示值與其啟動信號或與通過其他方法測得的真實值相關聯的過程。在規定條件下,為確定測量儀器儀表或測量系統所指示的量值,或實物量具或參考物質所代表的量值,與對應的由標準所復現的量值之間關系的一組操作。其目的是通過與標準比較確定測量裝置的示值。
紫外可見分光光度計的校正內容如下:
1.波長校正
由于溫度變化對機械部分的影響,波長通常會有略微的變化。因此需要定期對儀器進行全面校正檢定,同時在每次測定前應該校正波長。校正波長可以利用儀器中的氫燈特定波長的譜線或氘燈的特定波長譜線,也可以利用苯在無水乙醇中的紫外特征吸收峰進行校正。根據波長長度的不同可分為:
短波長區校正:苯蒸氣吸收光譜或苯在無水乙醇的紫外特征吸收峰;
中波長區校正:氫燈或氘燈發射譜線,常用486.13nm(F線)656.28nm(C線);
長波長區校正:鐠釹玻璃的吸收光譜。
2.吸光度校正
《中國藥典》2015版中規定吸光度的準確度采用約60mg/L重鉻酸鉀的硫酸溶液(0.005mol/L),在規定的波長處測定并計算吸收系數,得出的吸收系數再與規定的波長的吸收系數相比,應符合規定(相對誤差在±1%內)。
3.吸收池校正
用于盛放試樣溶液和空白溶液的吸收池應相互匹配,即厚度和透光性應該一致,否則需要進行校正。分析測定時,應首先對配套的吸收池進行透光率一致性的核對。將吸收池進行編號作標記,裝上空白溶液,然后在測量波長出處比較各吸收池的透光率,配對的吸收池的透光率相差應不超過0.5%,測吸光度,兩次之差應小于1%。否則,應將吸收池洗滌后重新裝上空白溶液在進行測量,若仍不符合配對要求,將透光率大的吸收池調節為透光率100%,即吸光度為零。測定其余各吸收池的吸光度,作為其校正值。測量樣品時,以上述透光率大的吸收池作參比池,用其他吸收池裝試樣溶液,測得的吸光度減去相應的校正值。