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            超聲波細胞破碎儀的常見問題你會處理嗎?

            發布時間:2020-12-24 點擊量:821
              超聲波細胞破碎儀的用途十分廣泛,可安全地處理一定體積范圍內的多種有機和無機物質。典型應用包括樣品制備、細胞裂解、分解、均化、顆??s徑、土壤測試以及加快化學反應。
              探頭振動形成數百萬個微氣泡,微氣泡不斷膨脹并發生劇烈爆破。這種稱為空穴現象的現象可以在探頭尖部產生強力的剪切作用,從而引起液體中分子強烈振動。探頭由鈦合金制成,可以作為一個機械變量器來提高由轉換器所產生的振動的振幅。探頭直徑越大,可以處理的樣品量則越多,但是超聲波強度會相應降低。當處理體積更多,粘度更大的樣品,或在高壓條件下工作時,需要使用更大功率的破碎儀。當處理含有機溶劑的樣品或低表面張力的液體時,通常使用一體式探頭。
              超聲波細胞破碎儀的常見問題處理:
              1.怎樣合理選擇超聲波破碎儀參數?
              不同型號的設備功率不一樣,功率的大小決定了使用變幅桿的大小范圍,使用多大的變幅桿就在設備的上調至該刻度。變幅桿的大小決定了處理量。一般情況,5ml以下選3mm,5-50ml可選6-8mm,50ml以上選10mm以上的變幅桿。占空比不用關心,主要是指超聲時間和停頓時間的比值。
              2.為什么用塑料大試管不用玻璃管?
              如果使用玻璃管可能會碎裂,而通常使用的是塑料試管。超聲波是物質介質中的一種彈性機械波,它既是一種波動形式,又是一種能量形式。超聲波破碎儀對細胞的作用主要有熱效應,空化效應和機械效應。熱效應是當超聲在介質中傳播時,摩擦力阻礙了由超聲引起的分子震動,使部分能量轉化為局部高熱(42-43℃)??栈窃诔曊丈湎?,生物體內形成空泡,隨著空泡震動和其勐烈的聚爆而產生出機械剪切壓力和動蕩。另外,空化泡破裂時產生瞬時高溫(約5000℃)、高壓,可使水蒸氣熱解離產生。OH自由基和H原子,由OH自由基和H原子引起的氧化還原反應可導致多聚物降解、酶失活、脂質過氧化和細胞殺傷。機械效應是超聲的原發效應,超聲波在傳播過程中介質質點交替地壓縮與伸張構成了壓力變化,引起細胞結構損傷。損傷作用的強弱與超聲的頻率和強度密切相關。
              3.從細胞中提取酶破碎時間長影響到酶的活性怎么辦?
            如果需要的是胞內酶,細胞破碎程度和需要的酶獲得之間基本上有正比關系。破碎時間長的確會影響到酶的活性。這就需要在佳的破碎時間和酶活性之間做出判斷,直接的辦法是先繪制相關曲線。如果實驗中超聲波破碎儀破碎的是棒狀桿菌,破碎時間控制在30min左右,酶活較好。如果是基質菌絲的話,好可以考慮用溶菌酶處理一下。 
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